兔场实验室细菌培养技术(3)

2017-07-29

(3)穿刺接种法:本法适用于半固体、固体培养基以及微量发酵管的接种,用来做细菌的生化和动力学实验。沿培养管中心直刺至距管底约0.5厘米处,然后再沿穿刺线退出接种针。

(4)液体培养基接种法:方法基本同斜面接种法,将接种环在培养管壁的液面下摩擦,然后再在液体中振动几次,塞好塞子。注意塞子和管口的灭菌操作。

3.细菌培养方法

细菌的培养方法根据细菌的生长特性、培养目的、要求等不同而不同。主要分为以下几种:

(1)需氧培养法:即一般培养法。细菌接种培养基后,置于37℃培养箱内培养即可。适用于需氧菌及兼性厌氧菌的分离培养。

(2)二氧化碳培养法:某些细菌要在一定的二氧化碳环境中才能良好生长。

①烛缸法:将接种的培养基置于干燥器内,点燃蜡烛后,密封好,连同容器一起置温箱中培养。

②化学法:每升容器中按照碳酸氢钠0.4克,盐酸3.5毫升的比例,分别装入两个小容器中,置于干燥器中,密封后使两药接触产生二氧化碳。

③二氧化碳培养箱法:将培养基置于特制的二氧化碳培养箱中培养,可以根据需要调节二氧化碳的浓度。

(3)厌氧培养法:

①换气法:将培养基放入干燥器内,将干燥器内抽成真空,然后充入氮气、氢气和二氧化碳的混合气体,放人温箱中培养。

②焦性没食子酸法:焦性没食子酸在碱性溶液中形成焦性没食子酸盐,可以吸收空气中的氧气,从而造成无氧的环境,适合厌氧菌生长。培养方法:将平皿去盖翻转,放置焦性没食子酸1克,再覆上一层脱脂棉,在脱脂棉上滴加I0%的氢氧化钠1毫升,然后将接种好的平皿覆盖在翻转的盖上,迅速用蜡封固,置37℃温箱中培养2-4天,观察结果。接种的培养基如果是试管,可取大试管一支,底部放焦性没食子酸2克,并加玻璃珠10多粒,将培养基试管放在玻璃珠上,再沿大试管壁滴加10%氢氧化钠溶液2毫升,将大试管口用橡皮塞塞紧,置37℃温箱中培养。

③厌氧肝片肉汤接种:因肝片或肉渣内含有谷胱甘肽,可发生氧化反应而降低环境中的氧化势能,以利于厌氧菌的分离。接种方法是用接种环钩取病料,接种于培养基中,在37℃温箱中培养2-4天,观察结果。

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