兔场实验室细菌培养技术(2)

2017-07-29

高压灭菌好的营养琼脂融化后,冷却至55-60℃时加人脱纤维血液,注意必须确保无菌操作,加入血液后轻轻摇动,不使产生气泡,立即倒人无菌平皿或分装于灭菌试管中备用。

③用途:观察细菌的溶血情况,有些细菌的初次分离时需要此种培养基。

(5)厌氧肝片肉汤:

①材料:营养肉汤,动物肝块或肉渣,液体石蜡。

②方法:利用作肉汤的碎肉块、肉渣或者是动物肝脏少许,分装于试管中加营养肉汤5毫升,上层加液体石蜡0.5-1.0毫升.120℃20分钟灭菌备用。

③用途:厌氧菌的培养。

(6)麦康凯琼脂:

①材料:麦康凯琼脂粉38克,蒸馏水1000毫升。

②方法:将麦康凯琼脂粉加入蒸馏水中,搅拌浸泡1小时,加热使充分溶解,高压灭菌备用。

③用途:常用作大肠杆菌类细菌的分离培养。

2.细菌接种方法

(1)平板划线接种法:平板划线接种法是细菌分离培养中最常用的方法,能使细菌分散生长,形成单个菌落。左手持培养皿,用拇指、食指及中指将平皿揭开,角度不要超过20度,右手拿接种环,接种环与琼脂表面约呈45度角。取少许病料涂布于培养基边缘,火焰灭菌接种环,冷却后轻触培养基边缘的病料区,并向一边划出横线,可以连续划出一个小区,火焰灭菌接种环,冷却后将平皿转换角度,从第一个小区再向外划出一个小区,以后再按照同样方法分区将平板划满,注意只能在起始部位与前一个小区交叉。

(2)琼脂斜面接种法:本方法多用于菌种的保存,也可以用于细菌的分离。左手持斜面培养基,右手持接种环,火焰灭菌冷却后挑取所需的菌落,以右手小拇指夹住棉塞或胶塞,轻转后取出,注意不要污染,立即将管口和塞子火焰灭菌,将接种环伸入试管内,自斜面底部向管口方向划曲线,再经火焰消毒管口和塞子后盖严,进行培养。

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